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primEr5引物设计教程

首先打开软件 左上角来操作 file——new——dna sequence 这一项可以把你复制的序列粘贴进去 当然,你也可以选择另一个 file——open——dna sequence 去open一个新的文件。在接下来的界面里 复制你的序列,于是就将序列导入了点击search 进入下图界面开...

引物长度,20bp;Tm值可以设置在55度(实验的时候可以用60度退火);产物长度,100-150bp(如果没有合适的引物,产物长度可以设置在80-200)。 如需设计引物,可以微信搜索“为青生物”,由专业人员提供免费的荧光定量PCR引物设计服务。

1 选个得分最高的, 2 引物3`端没有碱基互补配对 3 引物在NCBI做一个primer blast。也可以直接在NCBI上设计引物啊

首先打开软件 左上角来操作 file——new——dna sequence 这一项可以把你复制的序列粘贴进去 当然,你也可以选择另一个 file——open——dna sequence 去open一个新的文件。在接下来的界面里 复制你的序列,于是就将序列导入了点击search 进入下图界面开...

我说个大概吧,荧光定量PCR引物设计 一般都是跨内含子(这样能去除DNA的干扰),另外TM值在50-55左右,长度20bp左右,PCR product size 一般为150bp左右,最好不要有交叠试的二聚体。其实你能保证跨内含子,一般都OK的。

打开primer premier 5.0——File——New—— DNA Sequence——COPY 特异序列到GeneTank——Primer——Search——PCR Primers,Pairs—— 设定Sense primer和Antisense primer的范围及PCR产物大小范围——设定引物长度(primer length)——Automatic——OK——Search com...

首先得下载安装一个primer5 的软件,网上百度搜索后即可下载获得 点击File下拉菜单,选择New,然后选择DNA Sequence 从word文件中copy目标序列,然后control+V到primer5的文本框中,选择As is,点击OK。 设计引物前得进行酶切位点分析,所以要点...

首先在设计引物的时候,要注意避免产生引物二聚体.现在的引物设计都会有一个dimer的选项,可以看出你设计的引物是否会发生二聚体.如果会形成二聚体,并且序列不能有大的变动,那就注意一下在3'端别发生dimer的互补. 其次,在PCR时提高退火温度可。

选取 目标片段长度在80-250bp的引物,在回头BLAST,特异性良好的话就可以了,一般我会多设计几个,选取最好的那个~

理论并不等于实践,能扩出来目的片段的引物就是好引物。 我Blast以后,在primer5中间按照文献给出的引物序列、位置、长度去查找引物在primer5软件中的评分以及发卡、二聚体。情况。然后发现文献中给出的引物在primer5中的评分都不是很高,一般只...

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